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牛糜蛋白酶elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

發(fā)布日期: 2011-05-05
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牛糜蛋白酶elisa試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶         7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶                         8 標(biāo)準(zhǔn)品(320 U/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條                  9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶                    10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶                     11 封板膜 2 張
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶                      12 密封袋 1 個(gè)

牛糜蛋白酶elisa試劑盒標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

牛糜蛋白酶elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中牛糜蛋白酶(Chymotrypsin)水平。用純化的牛糜蛋白酶(Chymotrypsin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入糜蛋白酶(Chymotrypsin),再與 HRP 標(biāo)記的糜蛋白酶(Chymotrypsin)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的糜蛋白酶(Chymotrypsin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中牛糜蛋白酶(Chymotrypsin)濃度。

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