輔酶II NADP(H)含量檢測試劑盒（MTT顯色法）說明書

微量法

貨號：BC1105

規(guī)格：100T/48S

產品內容：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1、 試劑二：臨用前加入4mL蒸餾水充分混勻，溶解后2-8℃保存4周。

2、 試劑四：臨用前將試劑四A溶解到試劑四B中，溶解后加入5mL蒸餾水，分裝保存，避免反復凍融，-20℃  保存4周。

3、 NADP標準品：臨用前加入 1.27 mL 蒸餾水，即 5 µmol/mL，-20℃可以保存2周。

4、 NADPH標準品：臨用前加入 1.2 mL 蒸餾水，即 5 µmol/mL，-20℃可以保存2周。

產品說明：

輔酶Ⅱ NADP(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，NADP⁺和 NADPH 含量測定可以計算 NADP（NADPH + NADP⁺)含量和 NADPH/NADP⁺比值，其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應密切相關。NADPH/NADP⁺比值不僅是細胞氧化還原態(tài)的主要標志之一，而且在 PPP 途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調控作用。

分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP⁺和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用，使氧化型噻唑藍（MTT）還原為甲瓚，570nm下檢測吸光值，從而測定 NADPH 含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP⁺為NADPH，從而檢測NADP⁺含量。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、低溫離心機、水浴鍋、研缽/勻漿器、超聲破碎儀、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸餾水。

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