淀粉分支
酶（SBE）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC1865
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取1支加入0.6mL蒸餾水，緩慢加熱，逐漸升溫至沸騰，使其充分溶解，2-8℃保存4周。

產(chǎn)品說明：
SBE（EC 2.4.1.18）主要存在于植物中，是參與支鏈淀粉合成的關鍵酶，測定SBE活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。
淀粉和碘結(jié)合后在660nm有特征光吸收，SBE可切斷支鏈淀粉側(cè)支，從而降低了淀粉-碘復合物在660nm吸收值，一定時間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項：

1. 可以在不同對照管中加入不同的樣本，然后集中進行1min沸水浴處理。

2. 試劑一如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混勻。

實驗實例：

1. 取約0.1g桃樹葉片加入1mL提取液，冰浴中勻漿。15000g，4℃離心15min，取上清置冰上，之后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算A對照管=0.399，A測定管=0.277，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

SBE活性(U/g 質(zhì)量)=（A對照管-A測定管）÷A對照管÷W×23.8=72.77 U/g 質(zhì)量。
相關發(fā)表文獻：
[1] Peitong Wang,Xi Chen,Xuan Xu,et al. Arsenate induced chlorosis 1/ translocon at the outer envolope membrane of chlooplasts 132 protects chloroplasts from Arsenic Toxicity. Plant physiology. October 2018;(IF6.305)
參考文獻：
[1] Jiang H, Dian W, Wu P. Effect of high temperature on fine structure of amylopectin in rice endosperm by reducing the activity of the starch branching enzyme[J]. Phytochemistry, 2003, 63(1): 53-59.
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