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  • 葡萄糖含量檢測試劑盒 糖代謝系列
  • 葡萄糖含量檢測試劑盒 糖代謝系列
產(chǎn)品名稱:

葡萄糖含量檢測試劑盒 糖代謝系列

產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-07-09
儲存條件
2-8℃
中文名稱
葡萄糖含量檢測試劑盒 糖代謝系列
有效期
6個月
單位

英文名稱
Glucose Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
分子式詳詢純度詳詢
分子量詳詢貨號BC2500
規(guī)格50管/48樣供貨周期現(xiàn)貨
主要用途葡萄糖含量檢測應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

葡萄糖含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號:BC2500
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體10mL×12-8℃保存
試劑二液體25 mL×12-8℃保存
試劑三液體25 mL×12-8℃保存

溶液的配制:
1、試劑一:1μmol/mL葡萄糖溶液;
2、混合試劑的配制:使用前將試劑二和試劑三1:1等體積混合,用多少配多少。
產(chǎn)品說明:
葡萄糖不僅是細(xì)胞能量代謝的主要底物,而且其代謝中間產(chǎn)物是生物合成的重要底物。植物可通過光合作用產(chǎn)生葡萄糖。就哺乳動物而言,葡萄糖不僅是大腦神經(jīng)系統(tǒng)、肌肉、脂肪組織等的能源,而且與還原性輔酶、乳糖和乳脂的合成密切相關(guān)。
葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,GOD)催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過氧化氫;過氧化物酶(Peroxidase,POD)催化過氧化氫氧化4-氨基安替*林偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在505 nm 有特征吸收峰。


技術(shù)指標(biāo):
低檢出限:0.01 μmol/mL
線性范圍:0.015-3 μmol/mL
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺式離心機、超聲破碎儀、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
1. 組織的處理:按照組織質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為15~10 的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL蒸餾水),研磨成勻漿,置沸水浴中煮沸10 min(蓋緊,防止水分散失),冷卻至室溫后,8000g,25離心10min,取上清液備用。

2. 細(xì)菌或細(xì)胞處理:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):蒸餾水體積(mL)為500~10001 的比例(建議500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL 蒸餾水),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率200W,超聲3 s,間隔10 s,重復(fù)30次),置沸水浴中煮沸10min(蓋緊,防止水分散失),冷卻至室溫后,8000g,25離心10min,取上清液備用。
二、測定步驟

  1. 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至505nm,蒸餾水調(diào)零。

  2. 樣本測定(在1.5mL EP管中依次加入下列試劑):

試劑(μL空白管標(biāo)準(zhǔn)管測定管
上清液--100
試劑一-100-
蒸餾水100--
混合試劑900900900

渦旋混勻,置于37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱反應(yīng)15min后,于505nm波長處讀取吸光度A,分別記為A空白、A標(biāo)準(zhǔn)和A測定。計算ΔA測定=A測定-A空白,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白。(空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測1-2次)。
三、葡萄糖含量計算

  1. 按蛋白濃度計算

葡萄糖含量(µmol/mg prot)= C ×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×V樣÷Cpr×V樣)=ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr

  1. 按樣本質(zhì)量計算

葡萄糖含量(µmol/g 質(zhì)量)= C ×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×V樣÷W÷V樣總×V樣)= ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn) ÷W

  1. 按細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計算

葡萄糖含量(µmol/106 cell)= C ×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×V樣÷5÷V樣總×V樣)= 0.2×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)
C:葡萄糖溶液濃度,1µmol/mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mLV樣:加入的樣本體積,100µL=0.1mLV樣總:樣本總體積,1mLW:樣本質(zhì)量,g;5:細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(以106計),5×106
注意事項:
(A測定-A空白)小于0.005,建議加大提取樣本質(zhì)量(或細(xì)胞數(shù)量)或者樣本上清液的加入量;(A測定-A空白)大于1.5,將上清液用蒸餾水稀釋即可。計算公式中注意乘以稀釋倍數(shù)。
實驗實例:



    1. 取0.1g小鼠肝臟加入1mL蒸餾水進行前處理步驟,離心取上清;再用蒸餾水稀釋2倍后按測定步驟測定,用玻璃比色皿得吸光值ΔA測定=A測定-A空白=0.758-0.006=0.752,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.600-0.006=0.594。按樣本質(zhì)量計算


葡萄糖含量(μmol/g 質(zhì)量)= ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W×2(稀釋倍數(shù))=0.752÷0.594÷0.1×2= 25.320 μmol/ g 質(zhì)量



    1. 取0.1g綠蘿葉片加入1mL蒸餾水進行前處理步驟,離心取上清后按測定步驟測定,用玻璃比色皿測得吸光值ΔA測定=A測定-A空白=0.539-0.006=0.533ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.600-0.006=0.594。按樣本質(zhì)量計算


葡萄糖含量(μmol/g 質(zhì)量)= ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.533÷0.594÷0.1=8.972 μmol/ g 質(zhì)量



    1. 取5百萬Jurkat細(xì)胞樣本加入1mL蒸餾水進行前處理步驟,離心取上清后按測定步驟測定,用玻璃比色皿測得吸光值ΔA測定=A測定-A空白=0.018-0.006=0.012,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.600-0.006=0.594。按細(xì)胞數(shù)量計算





葡萄糖含量(μmol/106 cell)  = 0.2×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)=0.2×0.012÷0.594=4.040×10-3 μmol/106 cell
相關(guān)發(fā)表文獻:
[1] Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou,et al. Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion. Cell Death and Disease. March 2019; (IF5.959)
[2] Jing Li,Yabing Duan,Chuanhong Bian,et al. Effects of validamycin in controlling Fusarium head blight caused by Fusarium graminearum: Inhibition of DON biosynthesis and induction of host resistance. Pesticide Biochemistry and Physiology. January 2019; 153:152-160. (IF2.87)
參考文獻:
[1] Basagni U, Bonicolini F. Ready to use liquid reagent for determining the glucose content in blood: U.S. Patent 5,077,199[P]. 1991-12-31.
[2] Kabasakalian P, Kalliney S, Westcott A. Enzymatic blood glucose determination by colorimetry of N, N-diethylaniline-4-aminoantipyrine[J]. Clinical chemistry, 1974, 20(5): 606-607.
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0340/BC0345 糖原含量檢測試劑盒
BC2540/BC2545 纖維素酶(CL)活性檢測試劑盒
BC0330/BC0335 海藻糖含量檢測試劑盒
BC2490/BC2495 血糖含量檢測試劑盒  

葡萄糖含量檢測試劑盒 糖代謝系列 葡萄糖含量檢測試劑盒 糖代謝系列

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